**章 玉米種子質(zhì)量鑒定技術(shù)的發(fā)展
**節(jié) 玉米種子質(zhì)量及種子質(zhì)量檢測的重要性
第二節(jié) 主要的種子鑒定技術(shù)
一、常規(guī)鑒定技術(shù)
二、現(xiàn)代鑒定技術(shù)
第三節(jié) 分子技術(shù)在玉米品種鑒定中的發(fā)展趨勢
一、從RAPD標記到SSR標記的技術(shù)提升
二、從SSR標記到SNP標記的技術(shù)探索
三、從非功能標記向功能標記的轉(zhuǎn)變
第二章 玉米品種DNA指紋鑒定標準試驗體系的建立
**節(jié) DNA提取方法的研究
一、DNA提取的基本方法及原理
二、DNA快速提取方法研究——堿煮法
三、高質(zhì)量DNA提取方法研究——改良高鹽低pH法
四、果皮組織DNA提取方法研究
第二節(jié) PcR擴增反應(yīng)程序和反應(yīng)體系的研究
一、通用PCR擴增反應(yīng)程序的建立
二、多重PCR擴增體系的建立
第三節(jié) 電泳檢測方法的研究
一、主要電泳檢測方法的比較
二、PAGE／快速銀染檢測法的研究
三、毛細管電泳多色熒光檢測與變性PAGE電泳銀染檢測兩種檢測方法的比較
四、毛細管電泳熒光檢測中的異常電泳類型及原因分析
第三章 核心引物的篩選確定及復(fù)合擴增體系的建立
**節(jié) 玉米DNA指紋鑒定中核心引物組合法的確立
一、特征譜帶法、引物組合法和核心引物組合法的概念
二、特征譜帶法、引物組合法和核心引物組合法的比較研究
第二節(jié) 玉米通用SSR核心引物篩選及高通量多重PCR復(fù)合擴增體系建立
一、研究目的
二、研究思路
三、核心引物的篩選
四、核心引物的重新設(shè)計
五、熒光多重PCR組合的建立
第四章 玉米DNA指紋庫數(shù)據(jù)統(tǒng)計及建庫標準化規(guī)范
**節(jié) DNA指紋庫數(shù)據(jù)的統(tǒng)計
一、建庫SSR引物基本信息
二、原始數(shù)據(jù)統(tǒng)計記錄方式
三、原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入數(shù)據(jù)庫的方式
第二節(jié) 玉米DNA指紋數(shù)據(jù)庫建庫標準化規(guī)范的建立
一、標記方法及標記來源
二、檢測平臺
三、試劑質(zhì)量保證
四、樣品的來源及性質(zhì)
五、引物及流程的評估
六、不同來源數(shù)據(jù)的有效整合
七、構(gòu)建品種DNA指紋模式庫
八、構(gòu)建品種DNA指紋擴展庫
九、數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù)的隨機盲測
第五章 玉米DNA指紋數(shù)據(jù)庫管理系統(tǒng)的建立
**節(jié) 數(shù)據(jù)信息表的整理
一、信息類資料
二、數(shù)據(jù)類資料
三、圖片類資料
第二節(jié) 分析功能的設(shè)計及實現(xiàn)
一、主要功能及定義
二、品種查詢比較功能的設(shè)計
三、親子鑒定功能的設(shè)計
四、品種指紋圖譜繪制功能的設(shè)計
五、一致性鑒定功能的設(shè)計
六、純度鑒定功能的設(shè)計
第三節(jié) 網(wǎng)站用戶權(quán)限分類及設(shè)計
第四節(jié) 未來發(fā)展戰(zhàn)略規(guī)劃
一、建立玉米DNA指紋國際聯(lián)合數(shù)據(jù)庫及管理系統(tǒng)
二、建立DNA指紋數(shù)據(jù)庫、分子標記輔助育種、單倍體育種技術(shù)三位一體的高效玉米育種技術(shù)體系
第六章 DNA指紋技術(shù)在玉米品種純度、一致性、特異性鑒定中的研究及應(yīng)用
**節(jié) DNA指紋技術(shù)在玉米品種純度鑒定中的應(yīng)用研究
一、玉米雜交種純度鑒定核心引物的選擇標準
二、特定品種純度鑒定特異引物選擇標準
三、雙親互補帶型——適于玉米雜交種純度鑒定的譜帶類型
四、玉米雜交種純度鑒定具體工作流程
第二節(jié) DNA指紋技術(shù)在玉米品種一致性鑒定中的應(yīng)用研究
一、一致性檢測中異型帶的類型
二、不同品種、不同位點一致性分布特征
三、一致性檢測標準的制定
四、造成品種一致性差的原因分析
第三節(jié) DNA指紋技術(shù)在玉米品種特異性鑒定中的應(yīng)用研究
一、現(xiàn)行的形態(tài)DUS測試系統(tǒng)面臨的問題
二、分子技術(shù)在玉米特異性測試中的應(yīng)用策略
三、分子測試標準的制定
四、需探討的幾個問題
第四節(jié) DNA指紋技術(shù)在玉米品種區(qū)域試驗中的應(yīng)用
一、我國玉米區(qū)域試驗品種DNA指紋檢測工作歷程
二、玉米區(qū)域試驗品種DNA指紋檢測工作特點
三、DNA指紋監(jiān)控工作值得思考的幾個問題
四、玉米區(qū)試DNA指紋檢測工作的意義
五、關(guān)于加強品種市場管理的對策建議
第七章 玉米品種實驗室鑒定技術(shù)具體操作程序
**節(jié) 玉米SSR標記鑒定技術(shù)
一、DNA提取
二、PCR擴增
三、電泳檢測
第二節(jié) 玉米種子清蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定技術(shù)
一、實驗?zāi)康?br> 二、儀器設(shè)備與試劑
三、溶液配制
四、電泳操作技術(shù)
第三節(jié) 玉米種子酯酶同工酶等電聚焦電泳
一、實驗?zāi)康?br> 二、儀器設(shè)備與試劑
三、溶液配制
四、電泳操作技術(shù)
附錄 法規(guī)文件匯編
國家玉米品種試驗DNA指紋鑒定管理辦法
玉米品種鑒定DNA指紋方法（NY／T1432—2007）
國家區(qū)試玉米品種一致性及真實性DNA指紋檢測技術(shù)
農(nóng)作物種子質(zhì)量監(jiān)督抽查管理辦法
*高人民法院關(guān)于審理侵犯植物新品種權(quán)糾紛案件具體應(yīng)用法律問題的若干規(guī)定
農(nóng)業(yè)植物新品種權(quán)侵權(quán)案件處理規(guī)定
北京市高級人民法院關(guān)于印發(fā)《北京市高級人民法院關(guān)于知識產(chǎn)權(quán)司法鑒定若干問題的規(guī)定（試行）》的通知
農(nóng)作物種子質(zhì)量糾紛田間現(xiàn)場鑒定辦法
北京市種子管理站行政處罰條例
DNA指紋圖譜測試指南：分子標記選擇和數(shù)據(jù)庫構(gòu)建（概要）
中華人民共和國種子法
農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理條例
中華人民共和國植物新品種保護條例實施細則（農(nóng)業(yè)部分）
主要農(nóng)作物品種審定辦法
農(nóng)業(yè)植物品種命名規(guī)定
主要參考文獻